An efficient new column‐free immunomagnetic isolation method for mouse CD4+CD25+ regulatory T cells
Notice bibliographique
Résumé
Mouse CD4 + CD25 + regulatory T cells (Tregs) are extremely difficult to isolate due to their rareness and the absence of a unique marker that differentiates them from other cell types. Their isolation typically requires at least two steps, often including sorting by FACS, which can be time consuming and very expensive. We thus sought to develop a simple and efficient method for Treg isolation using column‐free immunomagnetic cell separation (EasySep®). The resulting two‐step method begins with depletion of non‐CD4 + T cells, and is followed by selection on CD25 whereby both CD4 + CD25 + and CD4+CD25 neg T cell fractions can be isolated to a high level of purity (90.3 ± 3.4% CD4 + CD25 + , n=14). This new method proved to be highly efficient as cell output was routinely well over 10e06 Tregs per spleen. Intracellular flow cytometric analysis of FOXP3 expression clearly demonstrated that isolated CD4 + CD25 + T cell fractions were highly enriched for FOXP3 expressing cells (n=4). In vitro culture assays also showed that isolated CD4 + CD25 + T cells were able to strongly suppress CD4 + CD25 neg T cell proliferation responses (n=3). We are currently working towards fully automating the CD25 positive selection step using the RoboSep® cell separator. This will add further convenience to a method that enables the efficient isolation of highly purified CD4 + CD25 + FOXP3 + Tregs from mouse lymphoid tissues.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,003 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».