55 IN VITRO DEVELOPMENT OF ENUCLEATED DOMESTIC CAT OOCYTES RECONSTRUCTED WITH SKIN FIBROBLASTS OF DOMESTIC AND LEOPARD CATS
Notice bibliographique
Résumé
The domestic cat is a valuable model for studies in assisted reproductive technology in felid species. Therefore, in this experiment we evaluated the in vitro developmental potential of enucleated domestic cat oocytes reconstructed with somatic cells from domestic and leopard cats. Skin fibroblasts were isolated from female domestic and leopard cats. The oocytes were collected by aspiration of follicles from ovaries that were superovulated with 200 IU PMSG. In vitro-matured oocytes were enucleated and individual donor cells (diameter 14–16 µm) were inserted into the perivitelline space of the enucleated oocyte. Fusion was performed at 26–27 h post-maturation by placing a cell-oocyte couplet between both tips of the needle electrode and electrostimulating with a 2-DC pulse (30 V, 30 µs) in fusion medium containing 0.3 M Mannitol + 0.1 mM MgCl2. Activation was performed 1 to 2 h post-fusion by incubation in 7% ethanol at room temperature for 5 min followed by cultured in 10 µg mL-1 cycloheximide and 1.25 µg mL-1 cytochalasin D at 38°C in 5% O2, 5% CO2, 90% N2 conditions. After activation, the reconstructed embryos were cultured in 100-µL droplets of Tyrode’s medium (Gomez et al., 2003 Theriogenology 60, 239–251.) supplemented with 0.3% BSA at 38°C in a 5% O2, 5% CO2, 90% N2 environment for 2 d. Then, 8-cell embryos were cultured in 100-µL droplets of Tyrode’s medium supplemented with 10% FCS at 38°C in a 5% O2, 5% CO2, 90% N2environment for 5 d. The cleavage rates of oocytes reconstructed with either donor cell types were not different. The percentages of blastocyst formation from parthenogenotes and nuclear transfer embryos derived from domestic cat fibroblasts (8/56, 14.3% and 7/51, 13.7%, respectively) were significantly higher than that for nuclear transfer embryos constructed with leopard cat fibroblasts (3/45, 6.7%). These results indicate that enucleated domestic cat oocytes reconstructed with skin fibroblasts of leopard cats can develop to the blastocyst stage. This experiment was supported by Suranaree University of Technology. Table 1 In vitro development of domestic cat oocytes reconstructed with domestic and leopard skin fibroblasts and parthenogenetic activation
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».