Purification to homogeneity and characterization of nonproteolyzed potato (<i>Solanum tuberosum</i>) tuber hexokinase 1
Notice bibliographique
Résumé
We have developed an extraction procedure that improves the stability of potato ( Solanum tuberosum L.) tuber hexokinase (HK) after extraction. Using this protocol, we showed that at least four HK isoforms are present in this tissue, and they can be separated by hydrophobic-interaction chromatography on a butyl-Sepharose™ 4 Fast Flow column. One of the main HK isoforms was purified to homogeneity using further chromatographic separations on red dye, DEAE Fractogel, hydroxyapatite, cibacron blue, and MonoQ matrices. HK-specific activity of this fraction (10.2 U·mg protein–1) corresponds to an enrichment of more than 5500-fold, with a yield of 0.9%. This is the highest reported HK-specific activity from a plant source. The purified enzyme consisted of a monomer with a subunit apparent Mr of 51 kDa when analyzed by SDS–PAGE. This polypeptide was recognized by affinity-purified anti- Solanum chacoense Bitt. recombinant HK IgGs. The protein was digested with trypsin and its digestion products were subjected to MS – MS sequencing after HPLC separation. The sequences of these tryptic peptides matched the predicted coding sequence of the S. tuberosum HK1 gene with a coverage of 57%. Examination of the kinetic properties of the purified protein HK1 indicates that it may be regulated by the internal O2 concentration of the tuber because of its sensitivity to acidic pHs and inhibition by ADP.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».