Characterization of an intact two-component high-affinity nitrate transporter from Arabidopsis roots
Notice bibliographique
Résumé
AtNRT2.1, a polypeptide of the Arabidopsis thaliana two-component inducible high-affinity nitrate transport system (IHATS), is located within the plasma membrane. The monomeric form of AtNRT2.1 has been reported to be the most abundant form, and was suggested to be the form that is active in nitrate transport. Here we have used immunological and transient protoplast expression methods to demonstrate that an intact two-component complex of AtNRT2.1 and AtNAR2.1 (AtNRT3.1) is localized in the plasma membrane. A. thaliana mutants lacking AtNAR2.1 have virtually no IHATS capacity and exhibit extremely poor growth on low nitrate as the sole source of nitrogen. Near-normal growth and nitrate transport in the mutant were restored by transformation with myc-tagged AtNAR2.1 cDNA. Membrane fractions from roots of the restored myc-tagged line were solubilized in 1.5% dodecyl-β-maltoside and partially purified in the first dimension by blue native gel electrophoresis. Using anti-NRT2.1 antibodies, an oligomeric polypeptide (approximate molecular mass 150 kDa) was identified, but monomeric AtNRT2.1 was absent. This oligomer was also observed in the wild-type, and was resolved, using SDS-PAGE for the second dimension, into two polypeptides with molecular masses of approximately 48 and 26 kDa, corresponding to AtNRT2.1 and myc-tagged AtNAR2.1, respectively. This result, together with the finding that the oligomer is absent from NRT2.1 or NAR2.1 mutants, suggests that this complex, rather than monomeric AtNRT2.1, is the form that is active in IHATS nitrate transport. The molecular mass of the intact oligomer suggests that the functional unit for high-affinity nitrate influx may be a tetramer consisting of two subunits each of AtNRT2.1 and AtNAR2.1.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».