Gene transfer using artificial chromosomes containing a marker gene in primary cells and rat adjuvant arthritis
Notice bibliographique
Résumé
Transfer efficiency and optimal dose of transfection agent were determined using iododeoxyuridine (IdUrd)-incorporated AC es complexed to Superfect (Qiagen) (Cytometry Vol 44:100–105, 2001). Following transfection, AC es were antibody-labeled and cells were analyzed by flow cytometry and fluorescent photomicroscopy. Using optimized transfection conditions and after growing the cells under selection, we expanded the colonies and determined reporter gene expression. Cell lines or primary cells transfected with Aces containing the LacZ gene or control cells were injected into the right ankle joints of rats with adjuvant arthritis on day 12 after adjuvant immunization. Joints were harvested 2 and 7 days later and assayed for beta-gal activity. The delivery of intact artificial chromosomes was detected within 24 h post transfection. Maximum delivery rates of 27% were observed. Flow cytometry data correlated well with microscopic analysis. After growing cell lines and primary cells under selection, clones expressing LacZ and RFP were identified. Ex vivo transfer of the LacZ gene to the ankle joints of rats with AA resulted in expression of the marker gene in the synovium. In the other organs, LacZ expression was not detected two days after injection of the cells. The results demonstrate that IdUrd-labelled ACes can be detected 24 h after transfection. Both cell lines and primary cells can be efficiently transfected with AC es and express the transgene. In addition, we show successful local ex vivo gene transfer in a rat AA model using AC es containing a marker gene. This work demonstrates the potential feasibility of treating arthritis and other connective tissue diseases utilizing AC es as nonviral vectors for gene therapy.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,003 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».