49 IN VITRO DEVELOPMENT OF PORCINE CLONED EMBRYOS FOLLOWING DIFFERENT ACTIVATION TREATMENTS
Notice bibliographique
Résumé
The present study compared the development of cloned porcine embryos following different activation treatments. Cumulus-oocyte complexes (COCs) were aspirated from slaughterhouse ovaries and cultured for 22 h in NCSU#23 medium supplemented with 10% porcine follicular fluid, 0.57 mM cysteine, 0.5 µg mL-1 LH, 0.5 µg mL-1 FSH and 10 ng mL-1 EGF. The COCs were further cultured for an additional 22 h in the same medium at 39°C in an atmosphere of 5% CO2 in air, without hormonal supplements. Primary cultures of fibroblasts from a female fetus on Day 40 of gestation were established in DMEM + 15% FCS. For nuclear donation, cells at the 5th-6th passage were cultured in DMEM + 0.5% FCS for 5 days in order to arrest the cells in G0/G1. Following enucleation, oocytes were reconstructed by transfer of donor cells and fusion by means of three DC pulses (1.4 kV cm-1, 30 µs) delivered by a BTX 200, in 0.28 M mannitol containing 0.01 mM CaCl2 and 0.01 mM MgCl2. Eggs were then divided into three treatment groups; control (without further treatment, Group 1), eggs cultured in 10 µg mL-1 cycloheximide (CHX) for 5 h (Group 2), and eggs cultured in 1.9 mM 6-dimethylaminopurine (6-DMAP) for 5 h (Group 3). The eggs were then cultured in sets of 30 in 60 µL drops of NCSU#23 supplemented with 4 µg mL BSA (essentially fatty acid free) until Day 7 at 39°C in a humidified atmosphere of 5% CO2. On Day 4 the culture were fed by adding 20 µL NCSU#23 supplemented with 10% FBS. All experiments were performed as 4 replicates and statistical analysis was performed by one-way ANOVA (P < 0.05). Blastocyst development rates were significantly higher (P < 0.05) in Group 3 embryos compared to Group 1 controls (27.6 ± 2.7% v. 20.1 ± 4.1%, respectively), but rates did not differ in Group 2 (23.8 ± 5.7%) compared to control. Total cell number in Group 3 blastocysts was, however, significantly higher (P < 0.05) than in Groups 1 and 2 (44.6 ± 2.4 v. 19.9 ± 1.9 and 21.9 ± 2.1, respectively). These results suggest that 6-DMAP is more efficient than cycloheximide in the activation of electrically fused NT oocytes during in vitro production of cloned porcine embryos. [Supported by High Technology Development Project for Agriculture and Forestry Korea, MAF-SGRP, 300012-05-3-SB010 and Cho-A Pharm. Co. LTD.]
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».