Quantification of intact human insulin‐like growth factor‐I in serum by nano‐ultrahigh‐performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry
Notice bibliographique
Résumé
RATIONALE: Insulin-like growth factor-I is one of the biomarkers used to detect growth hormone administration prohibited in human sport. Current testing approaches for IGF-I rely on commercial immunoassays, which may change from time to time requiring complex revalidation. Mass spectrometry (MS)-based approaches often rely on enzymatically digesting the protein and measuring specific peptide concentrations. In order to reinforce the current available methodology for IGF-I testing, a reliable and equally sensitive MS method is required for the analysis of intact protein using small sample volumes (<25 μL). METHODS: IGF-I was extracted from human serum samples by a simple protein precipitation procedure. Separation was achieved via nano-ultrahigh-performance liquid chromatography and MS analysis was conducted by nano-electrospray ionisation triple-quadrupole mass spectrometry in the selected reaction monitoring mode using a stable-isotope-labelled internal standard. RESULTS: A six-point calibration curve ranging from 50 to 1000 ng/mL of human IGF-I in rat serum was used to establish instrument response. The method provided a limit of quantification of 50 ng/mL, with intra- and inter-day precision ≤5% and intra- and inter-day accuracy ≥95%. CONCLUSIONS: A quantitative method was developed for the quantification of intact IGF-I in human serum samples. The data generated provided important information for the development of a new reference method for the growth hormone biomarker test and helped create a reliable system for monitoring peptide hormones in individual athletes, a possible extension to the athlete biological passport system. Nano-electrospray has here been shown to be sufficiently robust for routine use in an analytical laboratory, allowing for the analysis of minute sample volumes.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,002 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».