Fast Apple (<i>Malus</i> × <i>domestica</i>) and Tobacco (<i>Nicotiana tobacum</i>) Leaf Polyphenol Oxidase Activity Assay for Screening Transgenic Plants
Notice bibliographique
Résumé
A spectrophotometric assay method for the analysis of polyphenol oxidase (PPO), in apple and tobacco leaves, has been optimized to increase efficiency in the screening of large numbers of transgenic plants. Crude protein extracts from leaf punches were prepared in a FastPrep homogenizer. The addition of Triton X-100 during extraction resulted in 44 and 74% increases in the PPO activity recovered, from apple and tobacco, respectively. The enzyme kinetics differed markedly between apple and tobacco. Apple leaf PPO was isolated in a latent state and was activated by the addition of SDS. In contrast, tobacco PPO activity was inhibited by SDS, particularly at acidic pH. Apple PPO showed a pronounced pH optimum around pH 6, whereas the pH profile for tobacco PPO was much flatter, with a broad optimum around pH 4. The calculated Km' value for apple PPO, using 4-methylcatechol as substrate, was 8.1, and for tobacco the Km was 4.3. The PPO reaction was strongly inhibited by tropolone, a Cu competitor, and restored by the addition of Cu2+. Several factors affecting variability in leaf PPO activity levels in plants are discussed.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».