Somatic Differentiation and MR Imaging of Magnetically Labeled Human Embryonic Stem Cells
Notice bibliographique
Résumé
Magnetic resonance (MR) imaging of superparamagnetic iron oxide (SPIO)-labeled stem cells offers a noninvasive evaluation of stem cell engraftment in host organs. Excessive cellular iron load from SPIO labeling, however, impairs stem cell differentiation. The purpose of this study was to magnetically label human embryonic stem cells (hESCs) via a reduced exposure protocol that maintains a significant MR signal and no significant impairment to cellular pluripotency or differentiation potential. hESCs were labeled by simple incubation with Food and Drug Administration-approved ferumoxides, using concentrations of 50- 200 µg Fe/ml and incubation times of 3-24 h. The most reduced exposure labeling protocol that still provided a significant MR signal comparable to accepted labeling protocols was selected for subsequent studies. Labeled hESCs were compared to unlabeled controls for differences in pluripotency as studied by fluorescence staining for SSEA-1, SSEA-4, TRA-60, and TRA-81 and in differentiation capacity as studied by quantitative real-time PCR for hOCT4, hACTC1, hSOX1, and hAFP after differentiation into embryoid bodies (EBs). Subsequent MR and microscopy imaging were performed to evaluate for cellular iron distribution and long-term persistence of the label. An incubation concentration of 50 µg Fe/ml and incubation time of 3 h demonstrated a significantly reduced exposure protocol that yielded an intracellular iron uptake of 4.50 ± 0.27 pg, an iron content comparable to currently accepted SPIO labeling protocols. Labeled and unlabeled hESCs showed no difference in pluripotency or differentiation capacity. Ferumoxide-labeled hESCs demonstrated persistent MR contrast effects as embryoid bodies for 21 days. Electron microscopy confirmed persistent lysosomal storage of iron oxide particles in EBs up to 9 days, while additional microscopy visualization confirmed the iron distribution within single and multiple EBs. Labeling hESCs with ferumoxides by this tailored protocol reduces exposure of cells to the labeling agent while allowing for long-term visualization with MR imaging and the retention of cellular pluripotency and differentiation potential.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».