Evidence for the Amphipathic Nature and Tilted Topology of Helices 4 and 5 in the Closed State of the Colicin E1 Channel
Notice bibliographique
Résumé
The membrane-bound closed channel structure of helices 4 and 5 (Lys-406-Asp-446) of the colicin E1 channel domain was investigated by using a site-directed fluorescence labeling technique. A bimane probe was covalently attached to a cysteine residue in a series of single-cysteine mutant proteins to scan each helix in a residue-by-residue fashion. A variety of fluorescence properties of the bimane fluorophore were measured for both the soluble and membrane-bound states of the channel peptide, including the fluorescence emission maximum, fluorescence anisotropy, and membrane bilayer penetration depth. The fluorescence properties were collated for construction of a membrane-bound topology model of helices 4 and 5 of the channel domain. Finally, the data reveal that both helices 4 and 5 are two separate amphipathic alpha-helices that are situated parallel to the membrane surface. Dual fluorescence quencher analysis shows that helix 4 adopts a tilted topology in which its C-terminus is more buried than its N-terminus within the bilayer. In contrast, helix 5 is relatively solvent-exposed and located parallel to the interfacial region of the membrane surface. However, the loop region of both helices 4 and 5 was shown to be relatively buried within the bilayer. In addition, a least-squares fit of the data to a harmonic wave function indicated that both periodicity and frequency are typical for an amphipathic alpha-helix (3.75 +/- 0.1 residues per turn for helix 4 and 3.70 +/- 0.1 residues per turn for helix 5). Squared residual plots of the harmonic wave function also reveal that the N-terminus of helix 4 is elongated by two residues from Lys-406 to Phe-404, while the C-terminus of helix 5 is elongated by three residues from Tyr-434 to Ile-437 upon membrane association.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».