Top‐down analysis of recombinant histone H3 and its methylated analogs by ESI/FT‐ICR mass spectrometry
Notice bibliographique
Résumé
Detailed characterization of the amino acid (aa) compositions of recombinant histone H3 (Xenopus laevis) and its Lys-9 mono-, di-, and trimethylated isoforms was carried out by ESI/FT-ICR-MS. The measured molecular masses of these four proteins did not agree with those predicted from the published wild-type histone H3 sequence. Using MS/MS with both collision-activated dissociation and electron capture dissociation, three aa substitutions (Gly102Ala, Cys110Ala, and Gly111Ala) were unambiguously identified in each protein by protein database searching and de novo peptide tag sequencing. In addition, it was determined through accurate mass measurement and elemental composition generation that Lys-9, to which the methyl groups are attached, is not in fact a lysine. Instead, it was identified as a chemical analog of lysine--aminoethylcysteine--in the methylated proteins. After incorporation of these three aa substitutions and the aminoethylcysteine into the protein sequences, the re-calculated molecular masses of four proteins were completely consistent with the measured values within 1 ppm. This work demonstrates the power of top-down MS for a detailed structural confirmation of recombinant proteins, even without prior information on aa substitutions or modifications.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».