A protease additive increases fermentation of alfalfa diets by mixed ruminal microorganisms in vitro1
Notice bibliographique
Résumé
In vitro experiments were conducted to examine the characteristics and mode of action of a protease that increased the ruminal fiber digestibility of alfalfa hay. A commercial source of protease (Protex 6L, Genencor Int., Rochester, NY), already characterized for its main activities, was further analyzed to determine protease activity in response to pH, molecular size by SDS-PAGE, specificity to degrade model or feed substrates, response to autoclaving, and action of specific protease inhibitors in the absence or presence of ruminal fluid. In addition, batch culture in vitro incubations in buffered ruminal fluid were conducted to compare the enzyme product with purified protease sources, and dose-response studies (0 to 10 microL/g of forage DM) were carried out using alfalfa hay as a substrate. The enzyme product was shown to be an alkaline protease (optimum pH >8.5) of approximately 30 kDa. Specificity in the absence of ruminal fluid showed that the enzyme was active against gelatin and casein to the same extent, whereas it had limited (21% of the total) activity on BSA. In the presence of ruminal fluid and with the use of feed substrates, the protease increased (P < 0.05) 22-h IVDMD (%) of alfalfa hay, fresh corn silage, dry-rolled corn, and a total mixed ration composed of the 3 ingredients (39.5 vs. 44.7; 50.3 vs. 54.5; 63.8 vs. 68.4; and 55.4 vs. 56.4 for control vs. protease for each feed, respectively). Inhibitor studies in the absence of ruminal fluid indicated that the enzyme was inhibited most by a serine protease inhibitor but not by cysteine- or metalloprotease inhibitors (10 vs. 1.9 and 0.1%, respectively). In the presence of ruminal fluid, the serine protease inhibitor reversed (P < 0.05) the increase in alfalfa IVDMD achieved by the enzyme product, such that IVDMD was similar to that of the control treatment. Comparisons among different proteases revealed that only pure subtilisin achieved increases in IVDMD that were similar to those with protease, suggesting the serine protease was subtilisin-like (EC 3.4.1.62). Dose-response studies using alfalfa hay as substrate showed quadratic responses in IVDMD, NDF digestion, and hemicellulose and protein disappearance. It is postulated that this enzyme acts by removing structural proteins in the cell wall, allowing ruminal microbes to gain faster access to digestible substrates.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».