Subunit Disassembly and Unfolding Kinetics of Hemoglobin Studied by Time-Resolved Electrospray Mass Spectrometry
Notice bibliographique
Résumé
We report the use of electrospray ionization (ESI) mass spectrometry (MS) in conjunction with online rapid mixing to monitor the kinetics of acid-induced ferrihemoglobin denaturation. Under equilibrium conditions, the hemoglobin mass spectrum is dominated by the intact heterotetramer. Dimeric and monomeric species are also observed at lower intensities. In addition, ionic signals corresponding to hexameric (tetramer-dimer) and octameric (tetramer x 2) hemoglobin species are observed. These complexes may represent weak solution-phase assemblies. The acid-induced denaturation process was monitored for reaction time ranging from 9 ms to approximately 3 s. The data obtained were subjected to a global analysis procedure which simultaneously fit all kinetic (ESI-MS intensity vs time) profiles to multiexponential expressions. Results of the global analysis are consistent with the coexistence of two subpopulations of tetrameric hemoglobin which differ in their disassembly rates and ESI charge states. The higher-charge state tetramer ions preferentially dissociate via a rapid pathway (tau(1) = 51 ms), resulting in the transient formation of a heme-saturated dimer, holo-alpha-globin, and a heme-deficient dimer. The latter is shown by MS/MS to be comprised of a heme-bound alpha-subunit complexed with an apo-beta-chain. The slow-decaying tetramer population, apparent at a slightly lower average charge state, breaks down into its monomeric constituents with no observable intermediate species (tau(2) = 390 ms). Surprisingly, unfolded apo-alpha-globin is formed more rapidly than unfolded apo-beta-globin. The appearance of the latter occurs with a relaxation time tau(3) of 1.2 s. It is postulated that accumulation of unfolded apo-beta-globin is delayed by transient population of an undetected unfolding intermediate.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».