Examination of gap junctional, intercellular communication by <i>in situ</i> electroporation on two co‐planar indium‐tin oxide electrodes
Notice bibliographique
Résumé
Gap junctions are plasma membrane channels between neighboring cells. We previously described a powerful technique where gap junctional, intercellular communication (GJIC) of adherent cells can be examined by in situ electroporation on a slide, part of which is coated with electrically conductive and transparent indium-tin oxide. An electric pulse is applied through an electrode placed on the cells in the presence of the tracking dye, Lucifer yellow (LY). The pulse causes LY's penetration into the cells growing on the conductive part of the slide, and the subsequent migration of the dye to the non-electroporated cells growing on the non-conductive area is microscopically observed under fluorescence illumination. Although this technique is adequate for a number of cell lines, the turbulence generated as the electrode is removed can cause cell detachment, which makes GJIC examination problematic. In this communication, we describe a slide configuration where junctional communication can be examined in the absence of an upper electrode: Cells are grown on two co-planar electrodes separated by a barrier which diverts the electric field, rendering it vertical to the cell layer. The elimination of an upper electrode is especially valuable for the electroporation of sensitive cells, such as terminally differentiated adipocytes. This technique can also be used for the introduction of other non-permeant molecules such as peptides or siRNA, followed by examination of the cellular phenotype or gene expression levels in situ.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».