Rapid regeneration of stable transformants in cultures of potato by improving factors influencing Agrobacterium-mediated transformation
Notice bibliographique
Résumé
An efficient and rapid Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation protocol was developed to generate activation-tagged mutant lines with the aim of large-scale functional analysis of the potato genome. The explants were inoculated with an Agrobacterium strain harboring the binary plasmid pSKI074 containing four CaMV 35S enhancers in the T-DNA region which activates the downstream genes in the host plant after its integration. Various parameters investigated to increase transformation efficiency were the type and age of explant, cultivar, hormone combinations, preculture of explants, period of co-cultivation with bacteria and concentration of bacterial cultures used for transformation. Stem explants from 5 week old plantlets of cv. Bintje which had undergone phytohormone pretreatment for 4 days, inoculation with diluted bacterial concentration of OD600 = 0.2 containing acetosyringone followed by 2 days of co-cultivation and selection in media with IAA and trans-zeatin all helped in greatly improving the transformation efficiency. The total time required from infection to rooted shoots was 6-7 weeks. Initial evidence for stable integration and expression of the transgenes by PCR analysis showed that over 93% of the regenerated lines were transgenic and this was confirmed by Southern hybridization.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».