A Capillary Mixer with Adjustable Reaction Chamber Volume for Millisecond Time-Resolved Studies by Electrospray Mass Spectrometry
Pourquoi ce travail est dans la base
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Notice bibliographique
Résumé
A novel continuous-flow apparatus for on-line kinetic studies of (bio)chemical solution-phase processes by electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) is described. The device is based on two concentric capillaries. Fluid is released from the inner capillary into the intercapillary space, where it mixes with solution flowing through the outer capillary, thus initiating the reaction of interest. Gas-phase analyte ions are formed near the tip of the outer capillary by pneumatically assisted ESI. This setup allows the mixer to be placed directly within the ion source, thus providing a minimal dead volume of ~8 nL. Time-resolved data can be recorded in both "spectral" and "kinetic" modes. In the former case, the position of the inner capillary is fixed at various points, such that entire mass spectra can be recorded for selected reaction times. For experiments in kinetic mode, the mass spectrometer monitors the signal intensity at selected m/z values, while the inner capillary is continuously pulled back, thus providing intensity-time profiles for specific reactive species. A theoretical framework is developed that allows the measured kinetics to be analyzed by taking into account the effects of laminar flow within the reaction capillary. Failure to take these effects into account results in erroneous rate constants. Studies on the demetalation kinetics of chlorophyll reveal that the apparatus can reliably measure rate constants up to at least 100 s-1. This represents a substantial improvement over previous ESI-MS-based kinetic methods. Spectral mode experiments on the refolding of ubiquitin show the changing proportions of denatured and tightly folded protein subpopulations in solution. When monitored in kinetic mode, the refolding process was found to proceed with a rate constant of 5.2 s-1.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,008 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle