In-line probing of RNA G-quadruplexes
Notice bibliographique
Résumé
Although the majority of the initial G-quadruplex studies were performed on DNA molecules, there currently exists a rapidly growing interest in the investigation of those formed in RNA molecules that possess high potential of acting as gene expression regulatory elements. Indeed, G-quadruplexes found in the 5'-untranslated regions of mRNAs have been reported to be widespread within the human transcriptome and to act as general translational repressors. In addition to translation regulation, several other mRNA maturation steps and events, including mRNA splicing, polyadenylation and localization, have been shown to be influenced by the presence of these RNA G-quadruplexes. Bioinformatic approaches have identified thousands of potential RNA G-quadruplex sequences in the human transcriptome. Clearly there is a need for the development of rapid, simple and informative techniques and methodologies with which the ability of these sequences, and of any potential new regulatory elements, to fold into G-quadruplexes in vitro can be examined. This report describes an integrated methodology for monitoring RNA G-quadruplexes formation that combines bioinformatic algorithms, secondary structure prediction, in-line probing with semi-quantification analysis and structural representation software. The power of this approach is illustrated, step-by-step, with the determination of the structure adopted by a potential G-quadruplex sequence found in the 5'-untranslated region of the cAMP responsive element modulator (CREM) mRNA. The results unambiguously show that the CREM sequence folds into a G-quadruplex structure in the presence of a physiological concentration of potassium ions. This in-line probing-based method is easy to use, robust, reproducible and informative in the study of RNA G-quadruplex formation.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».