Efficient purification of neonatal porcine gonocytes with Nycodenz and differential plating
Notice bibliographique
Résumé
Gonocytes are the only type of germ cells present in the postnatal testis and give rise to spermatogonial stem cells. Purification of gonocytes has important implications for the study and manipulation of these cells and may provide insights for the ongoing investigation of the male germline stem cells. To obtain a pure population of gonocytes from piglet testis cells, a wide range of Nycodenz concentrations were investigated for density gradient centrifugation. We also examined differential plating of testis cells for various culture durations with different extracellular matrix (ECM) components (fibronectin, poly-d-lysine, poly-L-lysine, laminin and collagen Types I and IV). Gonocytes were highly enriched in pellets of testis cells after using 17% Nycodenz centrifugation to a purity of 81±9%. After culturing testis cells on plates precoated with different ECM components for 120 min, the proportion of gonocytes increased among non-adherent cells (suspended in the medium), with fibronectin or poly-D-lysine resulting in the greatest (up to 85%) and laminin in the lowest (54%) gonocyte proportion. Combining the most promising ECM coatings (fibronectin and poly-d-lysine) and further extension of their culture duration to 240 min did not improve final gonocyte purity. However, centrifugation with 17% Nycodenz followed by differential plating with fibronectin and poly-d-lysine coating further purified gonocytes among the collected cells to >90%. These results provide a simple, quick and efficient approach for obtaining highly enriched populations of piglet gonocytes for use in the study and manipulation of these germline stem cells.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».