Rapid Multiplexed Flow Cytometric Assay for Botulinum Neurotoxin Detection Using an Automated Fluidic Microbead-Trapping Flow Cell for Enhanced Sensitivity
Notice bibliographique
Résumé
A bead-based sandwich immunoassay for botulinum neurotoxin serotype A (BoNT/A) has been developed and demonstrated using a recombinant 50 kDa fragment (BoNT/A-HC-fragment) of the BoNT/A heavy chain (BoNT/A-HC) as a structurally valid simulant. Three different anti-BoNT/A antibodies were attached to three different fluorescent dye encoded flow cytometry beads for multiplexing. The assay was conducted in two formats: a manual microcentrifuge tube format and an automated fluidic system format. Flow cytometry detection was used for both formats. The fluidic system used a novel microbead-trapping flow cell to capture antibody-coupled beads with subsequent sequential perfusion of sample, wash, dye-labeled reporter antibody, and final wash solutions. After the reaction period, the beads were collected for analysis by flow cytometry. Sandwich assays performed on the fluidic system gave median fluorescence intensity signals on the flow cytometer that were 2-4 times higher than assays performed manually in the same amount of time. Limits of detection were estimated at 1 pM (approximately 50 pg/mL for BoNT/A-HC-fragment) for the 15 min fluidic assay in buffer.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».