Purification of Plant-Derived Antibodies through Direct Immobilization of Affinity Ligands on Cellulose
Notice bibliographique
Résumé
Plants possess enormous potential as factories for the large scale production of therapeutic reagents such as recombinant proteins and antibodies. A major factor limiting commercial advances of plant-derived pharmaceuticals is the cost and inefficiency of purification. As a model system, we have developed a simple yet robust method for immobilizing affinity capture ligands onto solid supports by interfacing the secreted expression and coupling of a chimeric fusion protein in Pichia pastoris to microcrystalline cellulose in a single step. The fusion protein, which consisted of antibody-binding proteins L and G fused to a cellulose-binding domain (LG-CBD), was tethered directly onto cellulose resins added to P. pastoris cultures and subsequently used for antibody purification. Both the antibody-binding protein L and protein G domains were functional, as demonstrated by the ability of cellulose-immobilized LG-CBD to purify both a scFv antibody fragment from yeast and a human IgG1 monoclonal antibody from transgenic tobacco. Furthermore, combining two P. pastoris strains expressing LG-CBD and scFv with CP-102 cellulose in a single culture allowed for easy recovery of biologically active scFv. Direct immobilization of affinity purification ligands, such as LG-CBD, onto inexpensive support matrices such as cellulose is an effective method for the generation of functional, single-use antibody purification reagents. Straightforward preparation of purification reagents will help make antibody purification from genetically modified crop plants feasible and address one of the major bottlenecks facing commercialization of plant-derived pharmaceuticals.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».