Purification of Plant-Derived Antibodies through Direct Immobilization of Affinity Ligands on Cellulose
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Notice bibliographique
Résumé
Plants possess enormous potential as factories for the large scale production of therapeutic reagents such as recombinant proteins and antibodies. A major factor limiting commercial advances of plant-derived pharmaceuticals is the cost and inefficiency of purification. As a model system, we have developed a simple yet robust method for immobilizing affinity capture ligands onto solid supports by interfacing the secreted expression and coupling of a chimeric fusion protein in Pichia pastoris to microcrystalline cellulose in a single step. The fusion protein, which consisted of antibody-binding proteins L and G fused to a cellulose-binding domain (LG-CBD), was tethered directly onto cellulose resins added to P. pastoris cultures and subsequently used for antibody purification. Both the antibody-binding protein L and protein G domains were functional, as demonstrated by the ability of cellulose-immobilized LG-CBD to purify both a scFv antibody fragment from yeast and a human IgG1 monoclonal antibody from transgenic tobacco. Furthermore, combining two P. pastoris strains expressing LG-CBD and scFv with CP-102 cellulose in a single culture allowed for easy recovery of biologically active scFv. Direct immobilization of affinity purification ligands, such as LG-CBD, onto inexpensive support matrices such as cellulose is an effective method for the generation of functional, single-use antibody purification reagents. Straightforward preparation of purification reagents will help make antibody purification from genetically modified crop plants feasible and address one of the major bottlenecks facing commercialization of plant-derived pharmaceuticals.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle