Dimerization and interactions of <i>Brucella suis</i> VirB8 with VirB4 and VirB10 are required for its biological activity
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Notice bibliographique
Résumé
VirB8-like proteins are essential components of type IV secretion systems, bacterial virulence factors that mediate the translocation of effector molecules from many bacterial pathogens into eukaryotic cells. Based on cell biological, genetic, and x-ray crystallographic data, VirB8 was proposed to undergo multiple protein-protein interactions to mediate assembly of the translocation machinery. Here we report the results of a structure-function analysis of the periplasmic domain of VirB8 from the mammalian pathogen Brucella suis, which identifies amino acid residues required for three protein-protein interactions. VirB8 variants changed at residues proposed to be involved in dimerization, and protein-protein interactions were purified and characterized in vitro and in vivo. Changes at M102, Y105, and E214 affected the self-association as measured by analytical ultracentrifugation and gel filtration. The interaction with B. suis VirB10 was reduced by changes at T201, and change at R230 inhibited the interaction with VirB4 in vitro. The in vivo functionality of VirB8 variants was determined by complementation of growth in macrophages by a B. suis virB8 mutant and by using a heterologous assay of type IV secretion system assembly in Agrobacterium tumefaciens. Changes at Y105, T201, R230, and at several other residues impaired the in vivo function of VirB8, suggesting that we have identified interaction sites of relevance in the natural biological context.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle