Using <sup>15</sup>N‐Ammonium to Characterise and Map Potassium Binding Sites in Proteins by NMR Spectroscopy
Notice bibliographique
Résumé
A variety of enzymes are activated by the binding of potassium ions. The potassium binding sites of these enzymes are very specific, but ammonium ions can often replace potassium ions in vitro because of their similar ionic radii. In these cases, ammonium can be used as a proxy for potassium to characterise potassium binding sites in enzymes: the (1) H,(15) N spin-pair of enzyme-bound (15) NH4 (+) can be probed by (15) N-edited heteronuclear NMR experiments. Here, we demonstrate the use of NMR spectroscopy to characterise binding of ammonium ions to two different enzymes: human histone deacetylase 8 (HDAC8), which is activated allosterically by potassium, and the bacterial Hsp70 homologue DnaK, for which potassium is an integral part of the active site. Ammonium activates both enzymes in a similar way to potassium, thus supporting this non-invasive approach. Furthermore, we present an approach to map the observed binding site onto the structure of HDAC8. Our method for mapping the binding site is general and does not require chemical shift assignment of the enzyme resonances.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».