Isolating Human Islets of Langerhans Causes Loss of Decay Accelerating Factor (CD55) on β-Cells
Notice bibliographique
Résumé
It has previously been reported that human decay accelerating factor (DAF; CD55) is not expressed on cells isolated from human islets. We have investigated if this absence is caused by the islet isolation procedure and/or the single cell isolation technique. We focused on loss of DAF expression on beta-cells within the intact islet and on isolated individual beta-cells. We established that DAF was expressed in islets and on beta-cells prior to isolation by in situ analysis in the intact pancreas. In situ immunohistochemistry (IHC) was used to examine DAF expression on human pancreatic islets and isolated islets. A reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) specific for human DAF mRNA was developed to measure mRNA levels in situ in islets within the intact pancreas, isolated islets, and purified beta-cells. beta-Cells were purified by fluorescence-activated cell sorting. DAF protein expression on these purified cells was measured using flow cytometry. Expression of DAF protein was present on the islets, including beta-cells within the human pancreas; however, comparative data from IHC and flow cytometry revealed the absence of DAF protein on beta-cells in both isolated islets and single cell preparations. Furthermore, compared to mRNA levels detected by in situ RT-PCR in the intact pancreas and in human HEK 293 cells, isolated islets, and purified human beta-cells showed downregulation of DAF mRNA. mRNA was detectable in both of these preparations by RT-PCR; levels were lower following both the islet isolation process (53%) and single cell preparation (a further 62%) compared to HEK 293 controls. Human islet allotransplantation might be more successful if either de novo transfer of DAF onto the isolated islets or novel techniques for islet isolation preserving DAF could be developed.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».