Heterologous expression of Alteromonas macleodii and Thiocapsa roseopersicina [NiFe] hydrogenases in Escherichia coli
Notice bibliographique
Résumé
HynSL from Alteromonas macleodii 'deep ecotype' (AltDE) is an oxygen-tolerant and thermostable [NiFe] hydrogenase. Its two structural genes (hynSL), encoding small and large hydrogenase subunits, are surrounded by eight genes (hynD, hupH and hypCABDFE) predicted to encode accessory proteins involved in maturation of the hydrogenase. A 13 kb fragment containing the ten structural and accessory genes along with three additional adjacent genes (orf2, cyt and orf1) was cloned into an IPTG-inducible expression vector and transferred into an Escherichia coli mutant strain lacking its native hydrogenases. Upon induction, HynSL from AltDE was expressed in E. coli and was active, as determined by an in vitro hydrogen evolution assay. Subsequent genetic analysis revealed that orf2, cyt, orf1 and hupH are not essential for assembling an active hydrogenase. However, hupH and orf2 can enhance the activity of the heterologously expressed hydrogenase. We used this genetic system to compare maturation mechanisms between AltDE HynSL and its Thiocapsa roseopersicina homologue. When the structural genes for the T. roseopersicina hydrogenase, hynSL, were expressed along with known T. roseopersicina accessory genes (hynD, hupK, hypC1C2 and hypDEF), no active hydrogenase was produced. Further, co-expression of AltDE accessory genes hypA and hypB with the entire set of the T. roseopersicina genes did not produce an active hydrogenase. However, co-expression of all AltDE accessory genes with the T. roseopersicina structural genes generated an active T. roseopersicina hydrogenase. This result demonstrates that the accessory genes from AltDE can complement their counterparts from T. roseopersicina and that the two hydrogenases share similar maturation mechanisms.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».