PC and PE synthesis: Mixed micellar analysis of the cholinephosphotransferase and ethanolaminephosphotransferase activities of human choline/ethanolamine phosphotransferase 1 (CEPT1)
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Notice bibliographique
Résumé
The human choline/ethanolamine phosphotransferase 1 (CEPT1) gene codes for a dual-specificity enzyme that catalyzes the de novo synthesis of the two major phospholipids through the transfer of a phosphobase from CDP-choline or CDP-ethanolamine to DAG to form PC and PE. We used an expression system devoid of endogenous cholinephosphotransferase and ethanolaminephosphotransferase activities to assess the diradylglycerol specificity of CEPT1. A mixed micellar assay was used to ensure that the diradylglycerols delivered were not affecting the membrane environment in which CEPT1 resides. The CEPT1 enzyme displayed an apparent Km of 36 microM for CDP-choline and 4.2 mol% for di-18:1 DAG with a Vmax of 14.3 nmol min(-1) mg(-1). When CDP-ethanolamine was used as substrate, the apparent Km was 98 microM for CDP-ethanolamine and 4.3 mol% for di-18:1 DAG with a Vmax of 8.2 nmol min(-1) mg(-1). The preferred diradylglycerol substrates used by CEPT1 with CDP-choline as the phosphobase donor were di-18:1 DAG, di-16:1 DAG, and 16:0/18:1 DAG. A major difference between previous emulsion-based assay results and the mixed micelle results was a complete inability to use 16:0(O)/2:0 as a substrate for the de novo synthesis of platelet-activating factor when the mixed micelle assay was used. When CDP-ethanolamine was used as the phosphobase donor, 16:0/18:1 DAG, di-18:1 DAG, and di-16:1 DAG were the preferred substrates. The mixed micelle assay also allowed the lipid activation of CEPT to be measured, and both the cholinephosphotransferase and ethanolaminephosphotransferase activities displayed the unusual property of product activation at 5 mol%, implying that specific lipid activation binding sites exist on CEPT1. The protein kinase C inhibitor chelerythrine and the human DAG kinase inhibitor R59949 both inhibited CEPT1 activity with IC50 values of 40 microM.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,002 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle