Targeted expression, purification, and cleavage of fusion proteins from inclusion bodies in <i>Escherichia coli</i>
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
Today, proteins are typically overexpressed using solubility-enhancing fusion tags that allow for affinity chromatographic purification and subsequent removal by site-specific protease cleavage. In this review, we present an alternative approach to protein production using fusion partners specifically designed to accumulate in insoluble inclusion bodies. The strategy is appropriate for the mass production of short peptides, intrinsically disordered proteins, and proteins that can be efficiently refolded in vitro. There are many fusion protein systems now available for insoluble expression: TrpLE, ketosteroid isomerase, PurF, and PagP, for example. The ideal fusion partner is effective at directing a wide variety of target proteins into inclusion bodies, accumulates in large quantities in a highly pure form, and is readily solubilized and purified in commonly used denaturants. Fusion partner removal under denaturing conditions is biochemically challenging, requiring harsh conditions (e.g., cyanogen bromide in 70% formic acid) that can result in unwanted protein modifications. Recent advances in metal ion-catalyzed peptide bond cleavage allow for more mild conditions, and some methods involving nickel or palladium will likely soon appear in more biological applications.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle