A ‘universal’ type II chaperonin PCR detection system for the investigation of Archaea in complex microbial communities
Notice bibliographique
Résumé
Bacteria and Archaea are evolutionarily and biochemically distinct domains found together in many environments. Robust 'universal' PCR primer sets targeting both the bacterial 16S rRNA gene and the type I chaperonin gene have been established. However, 'universal' PCR primers for Archaea are currently limited to the 16S rRNA gene. We investigated the type II chaperonin (known as the thermosome, TF55, CCT or TCP-1) as a potential universal target (UT) for Archaea. Reproducible amplification of thermosome gene sequences from all major phyla tested was achieved through the application of a mixture or 'cocktail' of two forward and two reverse primers. Phylogenies based on the ∼750-bp thermosome UT were congruent with 16S rRNA gene phylogenies while exhibiting longer branch lengths, improving resolution of closely related taxa. 'Universal' thermosome primers were applied to profiling the archaeal community of dairy cow rumen and results compared with profiles based on the 16S rRNA gene and methyl co-enzyme M reductase (methanogen-specific) gene. Clone libraries generated from each target gene, as well as a pyrosequencing profile of one thermosome rumen library, revealed that all three targets consistently detected Methanobrevibacter smithii, Methanobrevibacter ruminantium and Methanosphaera stadtmanae as the dominant constituents; however, thermosome gene sequences were more diverse than either of the other targets providing a higher resolution description of the archaeal community. These findings demonstrate that a 'universal' thermosome PCR protocol is a powerful metagenomic tool for detecting and characterizing Archaea and archaeal communities.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,002 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».