Nucleoside transporter subtype expression and function in rat skeletal muscle microvascular endothelial cells
Notice bibliographique
Résumé
1. Microvascular endothelial cells (MVECs) form a barrier between circulating metabolites, such as adenosine, and the surrounding tissue. We hypothesize that MVECs have a high capacity for the accumulation of nucleosides, such that inhibition of the endothelial nucleoside transporters (NT) would profoundly affect the actions of adenosine in the microvasculature. 2. We assessed the binding of [(3)H]nitrobenzylmercaptopurine riboside (NBMPR), a specific probe for the inhibitor-sensitive subtype of equilibrative NT (es), and the uptake of [(3)H]formycin B (FB), by MVECs isolated from rat skeletal muscle. The cellular expression of equilibrative (ENT1, ENT2, ENT3) and concentrative (CNT1, CNT2, CNT3) NT subtypes was also determined using both qualitative and quantitative polymerase chain reaction techniques. 3. In the absence of Na(+), MVECs accumulated [(3)H]FB with a V(max) of 21+/-1 pmol microl(-1) s(-1). This uptake was mediated equally by es (K(m) 260+/-70 microm) and ei (equilibrative inhibitor-insensitive; K(m) 130+/-20 microm) NTs. 4. A minor component of Na(+)-dependent cif (concentrative inhibitor-insensitive FB transporter)/CNT2-mediated [(3)H]FB uptake (V(i) 0.008+/-0.005 pmol microl(-1) s(-1) at 10 microm) was also observed at room temperature upon inhibition of ENTs with dipyridamole (2,6-bis(diethanolamino)-4,8-dipiperidinopyrimido-[5,4-d]pyrimidine)/NBMPR. 5. MVECs had 122,000 high-affinity (K(d) 0.10 nm) [(3)H]NBMPR binding sites (representing es transporters) per cell. A lower-affinity [(3)H]NBMPR binding component (K(d) 4.8 nm) was also observed that may be related to intracellular es-like proteins. 6. Rat skeletal muscle MVECs express es/ENT1, ei/ENT2, and cif/CNT2 transporters with characteristics typical of rat tissues. This primary cell culture model will enable future studies on factors influencing NT subtype expression, and the consequent effect on adenosine bioactivity, in the microvasculature.
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Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».