The <i>Vibrio cholerae</i> Mrp System: Cation/Proton Antiport Properties and Enhancement of Bile Salt Resistance in a Heterologous Host
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Notice bibliographique
Résumé
The <i>mrp</i> operon from <i>Vibrio cholerae </i>encoding a putative multisubunit Na<sup>+</sup>/H<sup>+</sup> antiporter was cloned and functionally expressed in the antiporter-deficient strain of <i>Escherichia coli</i> EP432. Cells of EP432 expressing Vc-Mrp exhibited resistance to Na<sup>+</sup> and Li<sup>+</sup> as well as to natural bile salts such as sodium cholate and taurocholate. When assayed in everted membrane vesicles of the <i>E. coli </i>EP432 host, Vc-Mrp had sufficiently high antiport activity to facilitate the first extensive analysis of Mrp system from a Gram-negative bacterium encoded by a group 2 <i>mrp</i> operon. Vc-Mrp was found to exchange protons for Li<sup>+</sup>, Na<sup>+</sup>, and K<sup>+</sup> ions in pH-dependent manner with maximal activity at pH 9.0–9.5. Exchange was electrogenic (more than one H<sup>+</sup> translocated per cation moved in opposite direction). The apparent K<sub>m</sub> at pH 9.0 was 1.08, 1.30, and 68.5 m<i>M</i> for Li<sup>+</sup>, Na<sup>+</sup>, and K<sup>+</sup>, respectively. Kinetic analyses suggested that Vc-Mrp operates in a binding exchange mode with all cations and protons competing for binding to the antiporter. The robust ion antiport activity of Vc-Mrp in sub-bacterial vesicles and its effect on bile resistance of the heterologous host make Vc-Mrp an attractive experimental model for the further studies of biochemistry and physiology of Mrp systems.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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