Investigating Interactions of Trehalose-Containing Liposomes with Human Red Blood Cells
Notice bibliographique
Résumé
A major obstacle in using intracellular sugars for the cryopreservation of mammalian cells is the inability of cells to synthesize or actively accumulate these sugars. We are investigating the use of liposomes, which are synthetic, microscopic vesicles, for the intracellular delivery of stabilizing sugars into mammalian cells. This study examines the interactions of trehalose-containing liposomes with human red blood cells (RBCs). Unilamellar liposomes were synthesized using an extrusion method to contain trehalose in the aqueous core. Liposomal preparations were labeled with a lipophilic fluorophore rhodamine B chloride (R18) at quenching concentrations (4 mol%), or the 5(6)-carboxyfluorescein [5(6)-CF] marker to label the intraliposomal aqueous phase. Flow cytometry and fluorescent microscopy were used to assess the interactions between fluorescently labeled liposomes and RBCs. The delivery of liposomal contents into RBCs was assessed by spectrophotometric measurement of intracellular trehalose. The results of this study show that the transfer of fluorescence from liposome to RBC population is due to both liposomal adsorption and fusion. The merger of membranes and lateral diffusion of liposomal lipids into the RBC bilayer resulted in the spatial separation of membrane R18 fluorophores, and therefore, a dequenching effect, marked by a 344 ± 11% increase of the RBC mean fluorescence intensity. The ability of 5(6)-CF and R18 liposomes to deliver their aqueous contents into RBCs was confirmed by intracellular trehalose measurement. After treatment with 5(6)-CF liposomes, RBC trehalose concentration was 0.18 ± 0.03 mM, whereas R18 liposomes delivered 0.96 ± 0.07 mM trehalose. The results from this study strongly support the hypothesis that liposomes can be used as trehalose delivery vesicles. Delineating the mechanism of liposomal interaction with RBCs is an important step toward establishing the use of liposomes as tools for the intracellular delivery of stabilizing disaccharides for biopreservation purposes.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».