Expression of multiple proteins using full‐length and deleted versions of cowpea mosaic virus RNA‐2
Notice bibliographique
Résumé
The use of multiple copies of vectors based on either full-length or deleted versions of cowpea mosaic virus RNA-2 for the production of heteromeric proteins in plants was investigated. Co-infiltration of two full-length RNA-2 constructs containing different marker genes into Nicotiana benthamiana in the presence of RNA-1 showed that the two foreign proteins were efficiently expressed within the same cell in inoculated tissue. Furthermore, the proteins were co-localized to the same subcellular compartments, an essential prerequisite for heteromer formation. However, segregation of two separate RNA-2 molecules, and therefore expression of the two proteins, was observed on systemic spread of the recombinant viruses. Thus, efficient assembly of heteromeric proteins is likely to occur only in inoculated tissue. To determine the optimum approach for expression in inoculated tissue, the heavy and light chains of the blood group-typing immunoglobulin G (IgG) C5-1 were inserted into full-length and deleted versions of RNA-2, and the constructs were agroinfiltrated in the presence of RNA-1. The results obtained showed that full-size IgG molecules accumulated using both approaches, but that the levels were significantly higher when deleted RNA-2 vectors were used. The levels were also greatly enhanced by the inclusion of an endoplasmic reticulum retention signal at the C-terminus of the heavy chain. As the potential benefit of using full-length RNA-2 constructs, the ability to spread systemically, appears to be irrelevant to the production of heteromeric proteins, the use of deleted versions of RNA-2 is clearly advantageous, particularly as they offer the benefit of biocontainment.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».