Molecular Characterization and Transcriptional Regulation of a Disintegrin and Metalloproteinase With Thrombospondin Motif 1 (ADAMTS1) in Bovine Preovulatory Follicles
Notice bibliographique
Résumé
The ovulatory process involves a complex remodeling of the extracellular matrix during which a desintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif 1 (ADAMTS1) is thought to play a key role, but its transcriptional regulation in bovine follicles remains largely unknown. The objectives of this study were to characterize the regulation of ADAMTS1 in bovine follicles before ovulation and to determine its transcriptional control in bovine granulosa cells. Regulation of ADAMTS1 was assessed using total RNA isolated from bovine preovulatory follicles obtained at various times after human chorionic gonadotropin treatment. Results from RT-PCR analyses showed that levels of ADAMTS1 mRNA were very low at 0 hours but increased at 6 to 24 hours after human chorionic gonadotropin in granulosa cells. To determine the regulatory mechanisms controlling ADAMTS1 gene expression in vitro, primary cultures of bovine granulosa cells were established, and treatment with forskolin up-regulated ADAMTS1 mRNA levels. Promoter activity assays, 5'-deletion, and site-directed mutagenesis identified a minimal region conferring full-length basal and forskolin-stimulated ADAMTS1 promoter activities, with both being dependent on Ebox cis-acting elements. EMSAs revealed upstream stimulating factor (USF) proteins as key trans-activating factors interacting with Ebox. Chromatin immunoprecipitation assays confirmed such interactions between USF and Ebox in vivo, and USF binding to Ebox elements was increased by forskolin treatment. ADAMTS1 promoter activity and mRNA expression were increased by forskolin and overexpression of the catalytic subunit of protein kinase A, but not by cotreatment with inhibitors of protein kinase A, ERK1/2, and epidermal growth factor receptor signaling pathways. Furthermore, treatment with a soluble epidermal growth factor induced ADAMTS1 mRNA expression in granulosa cells. Collectively, results from this study describe the gonadotropin/forskolin-dependent up-regulation of ADAMTS1 mRNA in granulosa cells of bovine preovulatory follicles in vivo and in vitro and identify for the first time some of the molecular mechanisms responsible for ADAMTS1 promoter activation in follicular cells of a large monoovulatory species.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
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Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».