ADP-Ribosylation of Cross-Linked Actin Generates Barbed-End Polymerization-Deficient F-Actin Oligomers
Notice bibliographique
Résumé
Actin filament subunit interfaces are required for the proper interaction between filamentous actin (F-actin) and actin binding proteins (ABPs). The production of small F-actin complexes mimicking such interfaces would be a significant advance toward understanding the atomic interactions between F-actin and its many binding partners. We produced actin lateral dimers and trimers derived from F-actin and rendered polymerization-deficient by ADP-ribosylation of Arg-177. The degree of modification resulted in a moderate reduction in thermal stability. Calculated hydrodynamic radii were comparable to theoretical values derived from recent models of F-actin. Filament capping capabilities were retained and yielded pointed-end dissociation constants similar those of wild-type actin, suggesting native or near-native interfaces on the oligomers. Changes in DNase I binding affinity under low and high ionic strength suggested a high degree of conformational flexibility in the dimer and trimer. Polymer nucleation activity was lost upon ADP-ribosylation and rescued upon enzyme-mediated deADP-ribosylation, or upon binding to gelsolin, suggesting that interactions with actin binding proteins can overcome the inhibiting activities of ADP-ribosylation. The combined strategy of chemical cross-linking and ADP-ribosylation provides a minimalistic and reversible approach to engineering polymerization-deficient F-actin oligomers that are able to act as F-actin binding protein scaffolds.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
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