Biochemical Characterization of the Roles of Glycines 24 and 27 and Threonine 179 in Tropomyosin from the Fast Skeletal Trunk Muscle of the Atlantic Salmon
Notice bibliographique
Résumé
Atlantic salmon fast skeletal muscle is composed of an α-type tropomyosin that shares 20 substitutions with a mammalian homologue. Prominent isomorphisms considered to be potentially destabilizing include threonine 179 (core, Ala in rabbit) and a unique pair of glycines, residues 24 and 27. Bacterially expressed mutant tropomyosins were isolated without exposure to elevated temperature or organic solvent. The Thr179Ala mutant is more resistant to heat-induced denaturation (Tm > 40 °C) than the nonmutant control (Tm = 37 °C) as monitored by far-UV circular dichroism [0.1 M salt and 1 mM DTT (pH 7)]. Changing one glycine to alanine has no detectable effect on the Tm versus the control value. An increase of 1 °C is observed for the double mutant (Gly27Ala/Gly24Ala). The preferred site of chymotryptic cleavage of recombinant salmon tropomyosin is between Leu 11 and Lys 12. The rate of the subsequent cleavage at Leu 169, the preferred site in rabbit tropomyosin, is reduced via replacement of Thr 179 with Ala. Thin filaments reconstituted with this mutant display greater Ca(II) induction of the myosin steady-state MgATPase versus control. Glycine-induced local instability is demonstrated by Escherichia coli outer membrane protease T (Omp-T) cleavage between Lys 6 and Lys 7. The control is more susceptible to proteolysis at this site than the mutants, which are distinct from each other: control > Gly27Ala > Gly24Ala > double mutant (most resistant to Omp-T). Similarly, the double mutant is comparatively more resistant to cleavage at Leu 11. By inference, the mid- and amino-terminal sections of salmon tropomyosin are intrinsically less stable than those in mammals, suggesting greater flexibility. Neighboring glycines make up a new destabilization motif in tropomyosin.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».