Characterization of Retroviral Gene Transfer into Highly Purified Human CD34− Cells with Primitive Hematopoietic Capacity
Notice bibliographique
Résumé
Primitive human hematopoietic cells have recently been identified within a rare subfraction of CD34(-) lineage-depleted (Lin(-)) cells and further characterized by their restriction to a rarer subset expressing AC133. Here we show that CD34(-)AC133(+)Lin(-) cells can be transduced by retrovirus at a comparatively higher efficiency than either CD34(-)AC133(-)Lin(-) or CD34(+)CD38(-)Lin(-) cells. Subpopulations were transduced by enhanced green fluorescent protein (eGFP)-containing retrovirus in serum-free conditions. During the culture period, both CD34(-)AC133(+)Lin(-) and CD34(+)CD38(-)Lin(-) subfractions expanded, whereas CD34(-)AC133(-)Lin(-) cells could not be sustained. Fluorescent microscopic examination of progenitors assayed by colony-forming units (CFU) derived from CD34(-)AC133(+)Lin(-) cells revealed expression of eGFP, with the presence of provirus confirmed by clonal PCR analysis. Flow cytometry detecting eGFP revealed that cultures seeded with CD34(-)AC133(+)Lin(-) cells had a greater than threefold higher frequency of eGFP(+) cells compared with transduced cultures of CD34(+)CD38(-)Lin(-) cells. Our results demonstrate that retroviral transduction efficiency and level of transgene expression into CD34(-)AC133(+)Lin(-) cells is distinct to either CD34(-)AC133(-)Lin(-) or CD34(+)CD38(-)Lin(-) cells. This study represents the first evaluation of retroviral transduction into this population of primitive CD34(-) cells, and therefore provides the basis for optimization of gene transfer protocols to examine the role of gene-marked CD34(-) stem cells in a clinical setting.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».