A xyloglucan-specific family 12 glycosyl hydrolase from <i>Aspergillus niger</i>: recombinant expression, purification and characterization
Notice bibliographique
Résumé
A new GH12 (glycosyl hydrolase 12) family XEG [xyloglucan-specific endo-beta-1,4-glucanase (EC 3.2.1.151)] from Aspergillus niger, AnXEG12A, was overexpressed, purified and characterized. Whereas seven xyloglucanases from GH74 and two xyloglucanases from GH5 have been characterized previously, this is only the third characterized example of a GH12 family xyloglucanase. GH12 enzymes are structurally and mechanistically distinct from GH74 enzymes. Although over 100 GH12 sequences are now available, little is known about the structural and biochemical bases of xyloglucan binding and hydrolysis by GH12 enzymes. Comparison of the AnXEG12A cDNA sequence with the genome sequence of A. niger showed the presence of two introns, one in the coding region and the second one in the 333-nt-long 3'-untranslated region of the transcript. The enzyme was expressed recombinantly in A. niger and was readily purified from the culture supernatant. The isolated enzyme appeared to have been processed by a kexin-type protease, which removed a short prosequence. The substrate specificity was restricted to xyloglucan, with cleavage at unbranched glucose in the backbone. The apparent kinetic parameters were similar to those reported for other xyloglucan-degrading endoglucanases. The pH optimum (5.0) and temperature resulting in highest enzyme activity (50-60 degrees C) were higher than those reported for a GH12 family xyloglucanase from Aspergillus aculeatus, but similar to those of cellulose-specific endoglucanases from the GH12 family. Phylogenetic, sequence and structural comparisons of GH12 family endoglucanases helped to delineate features that appear to be correlated to xyloglucan specificity.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».