mEosFP-Based Green-to-Red Photoconvertible Subcellular Probes for Plants
Notice bibliographique
Résumé
Photoconvertible fluorescent proteins (FPs) are recent additions to the biologists' toolbox for understanding the living cell. Like green fluorescent protein (GFP), monomeric EosFP is bright green in color but is efficiently photoconverted into a red fluorescent form using a mild violet-blue excitation. Here, we report mEosFP-based probes that localize to the cytosol, plasma membrane invaginations, endosomes, prevacuolar vesicles, vacuoles, the endoplasmic reticulum, Golgi bodies, mitochondria, peroxisomes, and the two major cytoskeletal elements, filamentous actin and cortical microtubules. The mEosFP fusion proteins are smaller than GFP/red fluorescent protein-based probes and, as demonstrated here, provide several significant advantages for imaging of living plant cells. These include an ability to differentially color label a single cell or a group of cells in a developing organ, selectively highlight a region of a cell or a subpopulation of organelles and vesicles within a cell for tracking them, and understanding spatiotemporal aspects of interactions between similar as well as different organelles. In addition, mEosFP probes introduce a milder alternative to fluorescence recovery after photobleaching, whereby instead of photobleaching, photoconversion followed by recovery of green fluorescence can be used for estimating subcellular dynamics. Most importantly, the two fluorescent forms of mEosFP furnish bright internal controls during imaging experiments and are fully compatible with cyan fluorescent protein, GFP, yellow fluorescent protein, and red fluorescent protein fluorochromes for use in simultaneous, multicolor labeling schemes. Photoconvertible mEosFP-based subcellular probes promise to usher in a much higher degree of precision to live imaging of plant cells than has been possible so far using single-colored FPs.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».