Development of <i>Pichia pastoris</i> as a rumen escape vehicle for the intestinal delivery of recombinant proteins in ruminants
Notice bibliographique
Résumé
The effectiveness of cellular encapsulation as a method for delivery of bioactive proteins and limiting amino acids to the small intestine of ruminants was investigated. Intracellular expression of green fluorescent protein variant (GFPuv) in Pichia pastoris was used as a visible marker to assess the cellular integrity of P. pastoris and determine the potential of this approach for protecting recombinant proteins from microbial proteolysis in the rumen. Fluorescent cells were easily identified in the presence of strained ruminal fluid when viewed by epifluorescent microscopy, and intact cells were readily enumerated. Batch cultures with rumen digesta demonstrated that 93, 97 and 25% of P. pastoris cells remained intact after 36 to 48 h of incubation in clarified ruminal fluid, an isolated bacterial fraction, and whole ruminal fluid, respectively. In continuous culture (Rusitec) with a dilution rate of 0.75 d-1, 19% of P. pastoris cells flowed intact from the fermentation vessels. In vitro abomasal simulations demonstrated that 84% of inoculated P. pastoris had lysed within 12 h of incubation, a property that is necessary for the release of encapsulated protein prior to the small intestine. These in vitro studies suggest that P. pastoris may be an effective vehicle for post-ruminal delivery of bioactive proteins in ruminants. Key words: Ruminal escape vehicle, Pichia pastoris, green fluorescent protein, bypass protein
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».