Cysteine-directed cross-linking localizes regions of the human erythrocyte anion-exchange protein (AE1) relative to the dimeric interface
Notice bibliographique
Résumé
The human erythrocyte anion-exchanger isoform 1 (AE1) is a dimeric membrane protein that exchanges chloride for bicarbonate across the erythrocyte plasma membrane. Crystallographic studies suggest that the transmembrane anion channel lies at the interface between the two monomers, whereas kinetic analysis provides evidence that each monomer contains an anion channel. We have studied the structure-function relationship of residues at the dimeric interface of AE1 by cysteine-directed cross-linking. Single cysteine mutations were introduced in 16 positions of putative loop regions throughout AE1. The ability of these residues to be chemically cross-linked to their partner within the dimeric protein complex was assessed by mobility of the protein on immunoblots. Introduced cysteine residues in extracellular loops (ECs) 1-4 and intracellular loop 1 formed disulphide cross-linked dimers. Treatment with homobifunctional maleimide cross-linkers of different lengths (6, 10 and 16 A; 1 A identical with 0.1 nm) also cross-linked AE1 with introduced cysteines in EC5 and close to the start of transmembrane segment (TM) 1. On the basis of these data, tentative positional constraints of TMs 1-4 and 6 relative to the dimeric interface are proposed. Neither disulphide- nor maleimide-mediated cross-linking perturbed AE1 transport function, suggesting that loop-loop contacts across the dimeric interface are not primarily responsible for allosteric interactions between monomers within the functional dimeric protein complex.
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».