Mass spectrometric determination of gonadotrophin‐releasing hormone (GnRH) in human urine for doping control purposes by means of LC–ESI‐MS/MS
Notice bibliographique
Résumé
The decapeptide gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) is endogenously produced in the hypothalamus and secreted into the microcirculation between hypothalamus and pituitary gland. Here, the bioactive hormone is responsible for the release of luteinizing hormone (LH) and follicle-stimulating hormone (FSH) into the systemic circulation. Because an intermittent application of exogenous GnRH in young males increases the testosterone plasma level by stimulation of the Leydig cells, the potential misuse of the administered substance offers a reasonable relevancy for doping controls and is prohibited in accordance to the list of banned substances of the World Anti-Doping Agency (WADA). The presented method provides a mass spectrometric approach to determine the nondegraded hormone in regular doping control samples by utilizing a sample preparation procedure with solid phase extraction, immunoaffinity purification and a subsequent separation by liquid chromatography with ESI-MS/MS detection. For liquid chromatography/mass spectrometry two alternative instrumental equipments were tested: the first consisted of an Agilent 1100 liquid chromatograph coupled to an Applied Biosystem Q Trap 4000 mass spectrometer, the second equipment was assembled by a Waters Aquity nano-UPLC coupled to a Thermo LTQ Orbitrap high resolution/high accuracy mass spectrometer. In urine specimens provided from healthy volunteers GnRH was not detected in accordance to the recent literature, but in postadministration samples urinary concentrations between 20 to 100 pg/ml of the intact peptide were determined. The method offered good validation results considering the parameter specificity, linearity (5-300 pg/ml), limit of detection (LOD, approx. 5 pg/ml), precision (inter/intraday, < 20%) and accuracy (105%) using Des-pGlu(1)-GnRH as internal standard to control each sample preparation step.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,003 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».