Ensemble and Single-Molecule Fluorescence Spectroscopy of a Calcium-Ion Indicator Dye
Notice bibliographique
Résumé
The spectroscopic properties of Calcium Green 2 (CG-2), a dual-fluorophore Ca(2+) indicator dye, were characterized by a combination of steady state and time-resolved ensemble spectroscopic measurements, molecular mechanics calculations and single-molecule fluorescence spectroscopy. It was found that in Ca(2+) free solutions, CG-2 exists primarily as a highly quenched intramolecular dimer, but when bound to Ca(2+), the molecule adopts an extended, fluorescent conformation. The difference in emission properties of these two CG-2 conformations is explained in terms of simple exciton theory. Through single-molecule fluorescence measurements, we have shown that the bulk increase in ensemble fluorescence intensity correlates with a simple statistical increase in the number of fluorescent molecules in solution. In addition, we have also observed that the majority of CG-2 molecules photobleach in a single step, despite the molecule possessing two distinct fluorophores. A small fraction of molecules photobleach in multiple steps or show a series of transitions between emissive and nonemissive fluorescent states ("blinking"). We rationalize these photophysical phenomena using a simple model based on dipole-dipole Förster coupling between fluorophores in conjunction with irreversible photodamage to one of the constituent chromophores.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».