Evaluation of suitable reference genes for gene expression studies in bronchoalveolar lavage cells from horses with inflammatory airway disease
Notice bibliographique
Résumé
BACKGROUND: The stability of reference genes has a tremendous effect on the results of relative quantification of genes expression by quantitative polymerase chain reaction. Equine Inflammatory Airway Disease (IAD) is a common condition often treated with corticosteroids. The diagnosis of IAD is based on clinical signs and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid cytology. The aim of this study was to identify reference genes with the most stable mRNA expression in the BAL cells of horses with IAD irrespective of corticosteroids treatment. RESULTS: The expression stability of seven candidate reference genes (B2M, HPRT, GAPDH, ACTB, UBB, RPL32, SDHA) was determined by qRT-PCR in BAL samples taken pre- and post- treatment with dexamethasone and fluticasone propionate for two weeks in 7 horses with IAD. Primers' efficiencies were calculated using LinRegPCR. NormFinder, GeNorm and qBasePlus softwares were used to rank the genes according to their stability. GeNorm was also used to determine both the ideal number and the best combination of reference genes. GAPDH was found to be the most stably expressed gene with the three softwares. GeNorm ranked B2M as the least stable gene. Based on the pair-wise variation cut-off value determined with GeNorm, the number of genes required for optimal normalization was four and included GAPDH, SDHA, HPRT and RPL32. CONCLUSION: The geometric mean of GAPDH, HPRT, SDHA and RPL32 is recommended for accurate normalization of quantitative PCR data in BAL cells of horses with IAD treated with corticosteroids. If only one reference gene can be used, then GAPDH is recommended.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,003 | 0,004 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,002 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».