Generation of Monoclonal Antibodies Specific for Cell Surface Molecules Expressed on Early Mouse Endoderm
Notice bibliographique
Résumé
The development of functional cell populations such as hepatocytes and pancreatic beta cells from embryonic stem cell (ESC) is dependent on the efficient induction of definitive endoderm early in the differentiation process. To monitor definitive endoderm formation in mouse ESC differentiation cultures in a quantitative fashion, we generated a reporter cell line that expresses human CD25 from the Foxa3 locus and human CD4 from the Foxa2 locus. Induction of these reporter ESCs with high concentrations of activin A led to the development of a CD25-Foxa3+CD4-Foxa2+ population within 4-5 days of culture. Isolation and characterization of this population showed that it consists predominantly of definitive endoderm that is able to undergo hepatic specification under the appropriate conditions. To develop reagents that can be used for studies on endoderm development from unmanipulated ESCs, from induced pluripotent stem cells, and from the mouse embryo, we generated monoclonal antibodies against the CD25-Foxa3+CD4-Foxa2+ population. With this approach, we identified two antibodies that react specifically with endoderm from ESC cultures and from the early embryo. The specificity of these antibodies enables one to quantitatively monitor endoderm development in ESC differentiation cultures, to study endoderm formation in the embryo, and to isolate pure populations of culture- or embryo-derived endodermal cells.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».