Fluorescent‐activated cell‐sorting analysis of intracellular interferon‐γ and interleukin‐4 in fresh and frozen human peripheral blood T‐helper cells
Notice bibliographique
Résumé
T-helper (Th) cells can be classified into at least three subsets based on their cytokine profiles: Th0, Th1, and Th2. The functional significance of each subset of Th cells can be determined in isolated human peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Using two- or three-color cytometric detection of intracellular cytokines. These analyses have been limited by the requirement for fresh cells making sequential samples and longitudinal studies difficult. Cryopreservation of PBMC in liquid nitrogen for up to 1 year was evaluated to determine whether the Th1/Th2 ratio remained unchanged in cryopreserved lymphocytes. Aliquots of human PBMC from normal volunteers analyzed for activation using phorbol myristate acetate and evaluated using morphology showed that the surface marker expression was unchanged in fresh and frozen cells. Cytokine expression was measured using intracellular cytokine staining and three-color flow cytometric analysis. The percentages of cells producing interferon (IFN)-gamma or interleukin (IL)-4 were determined after 16 hours of phorbol myristate acetate and ionomycin stimulation in the presence of brefeldin A. No significant difference was found in cytokine production between fresh and frozen cells. The percentage of IFN-gamma and IL-4 producing CD3-positive fresh T cells was 19.2+/-5.8 percent and 0.9+/-0.4 percent vs. 17.6+/-0.75 percent and 0.9+/-0.3 percent, respectively, for frozen PBMC. The effects of thermal injury on the Th1/Th2 cytokine ratio and the development of hypertrophic scarring were then determined. Twelve burn patients examined 4 weeks postburn showed a significant shift in the Th1/Th2 ratio, compared with 13 normal human volunteers used as controls. IL-4 levels in the patient group were significantly higher than controls at 1 month postburn (12.7+/-2.6 percent vs. 3.9+/-0.5 percent, p<0.01) and IFN-gamma levels were significantly lower (9.3+/-1.7 percent vs. 15.3+/-2.3 percent, p<0.05). Thus, PBMC can be cryopreserved for up to 1 year, enabling investigation of chronologic changes in Th1/Th2 profiles. It is suggested that a "locked on" Th2 profile may contribute to the development of hypertrophic scarring after burn injury.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».