Cellular Differentiation in Primary Cell Cultures from Single Zebrafish Embryos as a Model for the Study of Myogenesis
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Notice bibliographique
Résumé
Culturing cells in vitro can produce a uniform population for the study of cellular differentiation, which is especially useful for the quantification of gene expression or the observation of subcellular structures. In zebrafish, a handful of immortalized cell lines have been used for these purposes, despite being heavily selected by passaging. Methods for primary cell culture of zebrafish embryonic blastomeres have been previously reported, but require combining a large number of genetically heterogeneous embryos, meaning that subsequent cell cultures are not clonal. Without genetically uniform cultures, this model system cannot exploit the wealth of available embryonic lethal mutants in zebrafish. We therefore describe methods for the generation of zebrafish embryonic blastomere cell cultures from single genetically characterized embryos. We examined myogenic differentiation and gene expression in single-embryo cultures from early wild-type embryos, as well as embryos containing an embryonic lethal mutation of unc45b, a myosin chaperone known to be required for sarcomere organization during myogenesis. We also demonstrated the practical usefulness of this technique by experimentally manipulating expression of specific genes in individual embryos before cell culture using standard tools of zebrafish biology such as morpholino-oligonucleotide gene knockdown and transgene-mediated gene expression.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle