Biorecognition through Layer-by-Layer Polyelectrolyte Assembly: In-Situ Hybridization on Living Cells
Notice bibliographique
Résumé
Encapsulated cells were formed from the assembly of cationic and anionic alternating layers using a number of polyelectrolyte-based systems. Chitosan, alginate, hyaluronic acid, and oligonucleotides were used as polyelectrolytes to encapsulate individual E. coli cells, which were used as a model. Zeta potential measurements taken for both chitosan/alginate and chitosan/hyaluronic acid systems indicate successful layer-by-layer (LbL) deposition and gave full reversal of the surface change eight times. Layer adsorption was further observed by fluorescence microscopy, and, through a newly developed protocol for sample preparation, transmission electron microscopy micrographs clearly showed the presence of LbL assembly on the outer layer of the cell membrane, in the nanometer range. A second generation of E. coli cells could be grown from encapsulated first generation cells, demonstrating that the cellular activity was not affected by the presence of polyelectrolyte multilayers. Hybridization between attached oligonucleotide sequences and the complementary sequence was demonstrated by both fluorescence spectroscopy and microscopy. Fluorescence energy transfer data recorded after hybrid formation showed that at a molar ratio of 10:20 (donor:acceptor), Q and I were 92.3% and 52.5%, respectively, which suggests that fluorescein fluorescence was quenched by 92.3% and that the fluorescence of rhodamine was enhanced by 52.5%. Oligonucleotide incorporation was stabilized by deposition of four alternating layers, hence offering not only the potential use of the encapsulated cell as a bio-recognition system but also its application in a number of fields such as oligonucleotide delivery, gene therapy, and the use of DNA as an immunocompatible coating.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».