Noncovalent labeling of myoglobin for capillary electrophoresis with laser‐induced fluorescence detection by reconstitution with a fluorescent porphyrin
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
Traditional protein labeling reactions for capillary electrophoresis (CE) with laser-induced fluorescence (LIF) detection suffer from a variety of disadvantages. The reactions can be nonquantitative on a reasonable time scale, require relatively high concentrations of protein and fluorophore, and can give multiple reaction products that can not be separated. Herein, we describe a new noncovalent labeling technique that is rapid, selective for myoglobin, and gives a simple reaction product. Myoglobin is denatured with either 5.4 M urea or low pH (2.0). The denatured myoglobin releases its nonfluorescent heme group. A fluorescent porphyrin (protoporphyrin IX (PPIX) or its zinc (II) complex, Zn-PPIX), is added to the mixture and the solution conditions are altered (dilute to 0.54 M urea or adjust pH to 7.0) to allow myoglobin refolding. Upon refolding, the protein incorporates PPIX from solution, thus making the reaction product fluorescent. The experimental conditions have been optimized for both urea and low-pH denaturation of myoglobin. The latter procedure produces a detection limit of 50 nM. Alternatively, the reaction can be performed without denaturation by a simple exchange of the porphyrins. The use of Zn-PPIX yields the most efficient reaction. The low-pH reaction is unaffected by a 2000-fold excess of bovine serum albumin.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle