Backbone Dynamics of TEM-1 Determined by NMR: Evidence for a Highly Ordered Protein
Notice bibliographique
Résumé
Backbone dynamics of TEM-1 beta-lactamase (263 amino acids, 28.9 kDa) were studied by 15N nuclear magnetic resonance relaxation at 11.7, 14.1, and 18.8 T. The high quality of the spectra allowed us to measure the longitudinal relaxation rate (R1), the transverse relaxation rate (R2), and the {1H}-15N NOE for up to 227 of the 250 potentially observable backbone amide groups. The model-free formalism was used to determine internal motional parameters using an axially anisotropic model. TEM-1 exhibits a small prolate axial anisotropy (D(parallel)/D(perpendicular) = 1.23 +/- 0.01) and a global correlation time (tau(m)) of 12.41 +/- 0.01 ns. The unusually high average generalized order parameter (S2) of 0.90 +/- 0.02 indicates that TEM-1 is one of the most ordered proteins studied by liquid-state NMR to date. Although the omega-loop has a high degree of order in the picosecond-to-nanosecond time scale (mean S2 value of 0.90 +/- 0.02), we observed the presence of microsecond-to-millisecond time scale motions for this loop, as for the vicinity of the active site. These motions could be relevant for the catalytic function of TEM-1. Amide exchange experiments were also performed, and several amide groups were not exchanged after 12 days, an indication that global motions in TEM-1 are also very limited. Although detailed dynamics characterization by NMR cannot be readily applied to TEM-1 in the presence of relevant substrates, the unusual picosecond-to-nanosecond dynamics behavior of TEM-1 presented here will be essential to the validation and improvement of future molecular dynamics simulations of TEM-1 in the presence of functionally relevant substrates.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».