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Enregistrement W2064366331 · doi:10.1021/bi002703z

Active Site Residues of Glutamate Racemase

2001· article· en· W2064366331 sur OpenAlexaff
Suzana Glavas, Martin E. Tanner

Notice bibliographique

RevueBiochemistry · 2001
Typearticle
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueAmino Acid Enzymes and Metabolism
Établissements canadiensUniversity of British Columbia
Organismes subventionnairesnon disponible
Mots-clésDeprotonationStereochemistryActive siteChemistryEnzymeCofactorPeptidoglycanBiochemistryOrganic chemistry

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

Glutamate racemase, MurI, catalyzes the interconversion of glutamate enantiomers in a cofactor-independent fashion and provides bacteria with a source of D-Glu for use in peptidoglycan biosynthesis. The enzyme uses a "two-base" mechanism involving a deprotonation of the substrate at the alpha-position to form an anionic intermediate, followed by a reprotonation in the opposite stereochemical sense. In the Lactobacillus fermenti enzyme, Cys73 is responsible for the deprotonation of D-glutamate, and Cys184 is responsible for the deprotonation of L-glutamate; however, very little is known about the roles of other active site residues. This work describes the preparation of four mutants in which strictly conserved residues containing ionizable side chains were modified (D10N, D36N, E152Q, and H186N). During the course of this research, the structural analysis of a crystallized glutamate racemase indicated that three of these residues (D10, E152, and H186) are in the active site of the enzyme [Hwang, K. Y., Cho, C.-S., Kim, S. S., Sung, H.-C., Yu, Y. G., and Cho, Y. (1999) Nat. Struct. Biol. 6, 422-426]. Two of the mutants, D10N and H186N, displayed a marked decrease in the values of k(cat), but not K(M), and are therefore implicated as important catalytic residues. Further analysis of the primary kinetic isotope effects observed with alpha-deuterated substrates showed that a significant asymmetry was introduced into the free energy profile by these two mutations. This is interpreted as evidence that the mutated residues normally assist the catalytic thiols in acting as bases (D10 with C73 and H186 with C184). An alternate possibility is that the residues may serve to stabilize the carbanionic intermediate in the racemization reaction.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Comment cette classification a été obtenuedéplier

Prédiction machine sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,000
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,000
Version: metacan-v3-hybrid-931329e0061cStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesaucune
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: Empirique
Score de désaccord entre enseignants0,001
Score d'incertitude au seuil0,004

Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0000,000
Bibliométrie0,0000,000
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0000,000
Science ouverte0,0000,000
Intégrité de la recherche0,0000,000
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0010,001

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,006
Tête enseignante GPT0,237
Écart entre enseignants0,231 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle

Classification

machine, non validée

Prédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.

Les modèles n’ont appliqué aucune catégorie : rien dans la taxonomie ne correspondait à ce travail.
Devis d'étudeExpérimental (laboratoire)
Domainenon disponible
GenreEmpirique

Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».

En bref

Citations90
Publié2001
Routes d'admission1
Résumé présentoui

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