Development of a Qualitative Sequential Immunoassay for Characterizing the Intrinsic Properties of Circulating Cardiac Troponin I
Notice bibliographique
Résumé
BACKGROUND: With myocardial infarction (MI), cardiac troponin is released from the heart into circulation, where it can be detected with immunoassays independently quantifying cardiac troponin I (cTnI) or cTnT. There is, however, no single immunoassay that sequentially probes the posttranslational modification status of cTnI or directly characterizes whether circulating cTnI is bound to cTnC and/or cTnT. Here we describe the development of a qualitative immunoassay to directly probe the primary and ternary structure of circulating cTnI through diffractive optics technology (dotLab System, Axela). METHODS: Anti-cTnI antibody 8I-7 was immobilized on a patterned sensor to capture cTnI. One or more detector antibodies were sequentially introduced to probe for amino acid sequence integrity or phosphorylation status of cTnI, or its association with cTnC and/or cTnT. Respective immunocaptures were recorded as real-time diffractive intensities (DIs), and the DI differences were analyzed. Each immunodetection was independent of the others but was done in a single sequential assay. RESULTS: This diffraction-based immunoassay successfully characterized cTnI. The unamplified assay determined whether cTnI was degraded at N-terminus and/or C-terminus or phosphorylated. Sequential application of multiple detector antibodies without an antibody-stripping step enables real-time interrogation of 5 different epitopes of cTnI, or direct detection of the cTn complex (cTnI-cTnC-cTnT) in a single sequential assay. Finally, this assay was optimized with amplification to directly detect circulating cTnI bound to cTnC and cTnT in serum from an MI patient. CONCLUSIONS: The dot Immunoassay is the first qualitative sequential immunoassay to address the direct interactions of the troponin subunits and various modified forms of cTnI.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».